|
Thông tin chi tiết sản phẩm:
|
| Tên sản phẩm: | Bộ công cụ PCR thời gian thực của virus Monkeypox (PCR-Fluorescence Probing) | Kênh phát hiện: | FAM |
|---|---|---|---|
| Vi mạch: | VIC | Giá trị Ct: | 35 |
| Kho: | -20 ℃ ± 5 ℃ | LOD: | 200 bản sao / mL |
| Các thành phần: | Bộ đệm phản ứng PCR, Hỗn hợp enzym PCR, Kiểm soát tích cực, Kiểm soát tiêu cực | Loại mẫu: | Gạc ngoáy mũi, ngoáy họng, nước bọt, nước tiểu, mô tổn thương, dịch tiết và máu, v.v. |
| Điểm nổi bật: | Bộ xét nghiệm PCR khỉ đậu FAM,Bộ xét nghiệm PCR khỉ đậu thời gian thực,Bộ xét nghiệm PCR thời gian thực Monkeypox FAM |
||
Bộ công cụ PCR thời gian thực của virus Monkeypox (PCR-Fluorescence Probing)
Bệnh đậu mùa trên khỉ là một bệnh truyền nhiễm từ động vật hiếm gặp, đặc trưng bởi các vết lở loét trên da do vi rút Monkey đậu mùa (MPV) gây ra và có các triệu chứng lâm sàng tương tự như bệnh đậu mùa.Nó có thể lây truyền qua tiếp xúc với chất dịch cơ thể, tổn thương trên da hoặc bề mặt niêm mạc bên trong, chẳng hạn như trong miệng hoặc cổ họng, các giọt đường hô hấp và các vật bị ô nhiễm.Phát hiện DNA của virus bằng phản ứng chuỗi polymerase (PCR) là xét nghiệm ưa thích đối với bệnh đậu mùa khỉ.
Monkeypox Virus Real Time PCR Kit dựa trên công nghệ PCR thời gian thực.Thích hợp để phát hiện định tính các axit nucleic của virus đậu mùa khỉ chiết xuất từ các mẫu lâm sàng như tăm bông mũi, tăm bông hầu họng, nước bọt, nước tiểu, mô tổn thương da, dịch tiết và máu, v.v.
Sự chỉ rõ
| tên sản phẩm | Bộ PCR thời gian thực của virus Monkeypox |
| Kênh phát hiện | FAM |
| Vi mạch | VIC |
| Giá trị Ct | 35 |
| Giới hạn phát hiện | 200 bản sao / mL |
| Kho | -20 ℃ ± 5 ℃ |
| Vận chuyển | Trong điều kiện đông lạnh |
| Hạn sử dụng | 12 tháng |
| Loại mẫu | Gạc ngoáy mũi, ngoáy họng, nước bọt, nước tiểu, mô tổn thương, dịch tiết và máu, v.v. |
| Bưu kiện | 24 Bài kiểm tra / Bộ, 48 Bài kiểm tra / Bộ, 96 Bài kiểm tra / Bộ |
| Các thành phần | Bộ đệm phản ứng PCR, Hỗn hợp enzyme PCR, Kiểm soát tích cực, Kiểm soát tiêu cực |
NGUYÊN TẮC KIỂM TRA
Bộ dụng cụ này áp dụng công nghệ PCR huỳnh quang thời gian thực, thích hợp để phát hiện axit nucleic của vi rút đậu mùa khỉ được chiết xuất từ các mẫu lâm sàng như huyết thanh người, mẫu dịch tiết tổn thương và mẫu gạc Mỗi hệ thống phản ứng có chứa mồi cụ thể và đầu dò huỳnh quang để phát hiện vi rút, và Axit nucleic của virus đậu mùa có thể được phát hiện một cách định tính bằng cách thu thập tín hiệu huỳnh quang được tạo ra bởi quá trình khuếch đại PCR.
Ngoài ra, các mồi cụ thể và đầu dò huỳnh quang để kiểm soát tiêu chuẩn nội bộ để phát hiện mẫu bệnh phẩm trên người được thêm vào mỗi hệ thống phản ứng và quá trình thu thập, vận chuyển và chiết xuất của mẫu cần đo được giám sát, cho biết kết quả âm tính giả. .
Hệ thống PCR thời gian thực: Molarray MA-6000, ABI 7500, ViiATM 7, QuantStudio 5, QuantStudio 6/7 pro, QuantStudio 6/7 flex, Agilent Mx3000P / 3005P, Rotor-GeneTM 6000 / Q, Bio-Rad CFX96 TouchTM / iQTM 5, Hongshi SLAN-96S / 96P, AGS8830, AGS4800.
CÁC THÀNH PHẦN
| Thông số kỹ thuật | LQ-000301 24T |
LQ-000302 48T |
LQ-000303 96T |
| Bộ đệm phản ứng PCR | 336μL × 1 ống | 672μL × 1 ống | Ống 672μL × 2 |
| Hỗn hợp enzyme PCR | 30μL × 1 ống | 50μL × 1 ống | 100μL × 1 ống |
| Kiểm soát tích cực | 50μL × 1 ống | 100μL × 1 ống | 200μL × 1 ống |
| Kiểm soát tiêu cực | 50μL × 1 ống | 100μL × 1 ống | 200μL × 1 ống |
| Hướng dẫn sử dụng (chiếc) | 1 | 1 | 1 |
CHỈ SỐ HIỆU SUẤT SẢN PHẨM
1. Độ nhạy: 200 bản sao / mL.
2. Tính đặc hiệu: Không có phản ứng chéo với Enterovirus (EV), Virus sởi (MV), Virus Rubella (RV), Varicella-zoster virus (VZV), Dengue virus (DenV), Human Parvovirus B19 (HPVB19), Epstein-barr virus (EBv), virus herpes ở người 6 (HHV-6), v.v.
3. Độ chính xác: CV ≤ 5%.
CÁC THỦ TỤC
1. Chuẩn bị mẫu
Việc tách chiết DNA từ các mẫu lâm sàng được tiến hành theo các yêu cầu và quy trình tương ứng trong bộ tách chiết DNA của virus.Trích xuất
DNA có thể được sử dụng trực tiếp để phát hiện.Nếu mẫu không được phát hiện ngay sau khi chiết thì nên bảo quản ở -70 ° C để chờ, tránh lặp lại các chu kỳ đông lạnh-rã đông.
2. Chuẩn bị hệ thống phản ứng
(1) Chuẩn bị hệ thống: Lấy thuốc thử ra khỏi bộ dụng cụ và để thuốc thử rã đông hoàn toàn ở nhiệt độ phòng.Đảo ngược hỗn hợp và ly tâm ngay lập tức.N phản ứng thử nghiệm (N = số lượng mẫu cần thử nghiệm + đối chứng dương tính + đối chứng âm tính + 1) được chuẩn bị cho các hệ phản ứng tương ứng như sau.
| Các thành phần | Thể tích cho 1 hệ phản ứng | Khối lượng cho hệ N phản ứng |
| Đệm phản ứng PCR | 14μL | 14μLx N |
| PCR hỗn hợp Enzyme | 1μL | 1μLx N |
| Tổng khối lượng | 15μL | 15μLx N |
(2) Phân bố hệ thống phản ứng: Trộn đều dung dịch đệm phản ứng ở trên, ly tâm và phân phối 15μL phần mẫu vào các ống PCR phù hợp với thiết bị PCR huỳnh quang.(Ly tâm các ống PCR ở 6.000 vòng / phút trong 30 giây và vận chuyển đến khu xử lý mẫu.)
3. Nạp mẫu (Khu xử lý mẫu)
Thêm lần lượt 10μL mẫu axit nucleic, đối chứng âm và đối chứng dương vào các ống PCR trên.Đậy chặt các ống và ly tâm ở tốc độ 6.000 vòng / phút trong 10s rồi vận chuyển đến vùng khuếch đại PCR.
* Đề phòng: Thêm mẫu theo thứ tự sau là
khuyến cáo: đối chứng âm tính-> mẫu axit nucleic -> đối chứng dương tính.
4. Khuếch đại PCR (vùng khuếch đại PCR)
4.1 Đặt các ống PCR có nắp vào máy PCR thời gian thực để khuếch đại.
4.2 Cài đặt điều kiện chu kỳ PCR huỳnh quang
| Chương trình | Nhiệt độ | Thời gian phản ứng | Số chu kỳ |
|
1 |
50 ° C | 2 phút | 1 |
| 2 | 95 ° C | 2 giây | 1 |
| 3 | 95 ° C | 1 giây | 41 |
| 60 ° C | 13 giây / 20 giây / 35 giây |
Thu tín hiệu huỳnh quang ở bước 3: 60 ℃;35 giây cho ABI 7500, 20 giây cho SLAN-96S / 96P, trong khi 13 giây cho Hệ thống PCR thời gian thực khác.Tổng khối lượng: 25μL.
4.3 Thải bỏ sau khi phát hiện
Vứt bỏ các ống PCR trong một túi kín sau khi phản ứng và xử lý các ống đã sử dụng như chất thải y tế.
5. Cài đặt để phân tích kết quả
Đặt đường cơ sở tại một vùng trước khi khuếch đại hàm mũ, nơi tín hiệu huỳnh quang của tất cả các mẫu tương đối ổn định (không có dao động đáng kể trong tất cả các mẫu);đặt điểm bắt đầu (số chu kỳ) cách xa các dao động tín hiệu khi bắt đầu
giai đoạn thu thập huỳnh quang;đặt điểm kết thúc (số chu kỳ) 1 ~ 3 chu kỳ trước Ct của mẫu đầu tiên để đưa vào khuếch đại hàm mũ.4 ~ 15 chu kỳ được khuyến khích.
Đặt ngưỡng ngay trên điểm cao nhất của đường cong khuếch đại điều khiển âm (đường cong nhiễu không đều).
6. Tiêu chí kiểm soát chất lượng
Trước khi đánh giá kết quả mẫu, Kiểm tra dương tính và Kiểm soát âm tính phải được giải thích bằng cách sử dụng bảng diễn giải bên dưới, và đường cong Kiểm soát dương tính và Kiểm soát âm tính phải được thực hiện chính xác, nếu không kết quả mẫu không hợp lệ.
| Kênh truyền hình/ Kiểm soát |
Giá trị ngưỡng chu kỳ (Ct) | |
| FAM | VIC | |
| Kiểm soát tích cực | Ct> 40 hoặc UNDET | Ct> 40 hoặc UNDET |
| Kiểm soát tiêu cực | Ct ≤ 35 | Ct ≤ 35 |
7. Giải thích kết quả kiểm tra
Các kênh FAM cho Virus đậu mùa, kết quả phát hiện sẽ được diễn giải như bên dưới.
a) Tích cực: Ct ≤ 38 và đường cong khuếch đại là hình chữ S.
b) Nghi ngờ: 38 <Ct ≤ 40 và đường cong khuếch đại có hình chữ S, cần kiểm tra lần thứ hai.Được coi là dương tính nếu Ct ≤ 40 và đường cong khuếch đại là hình chữ S đối với phép thử thứ hai.Được coi là âm tính nếu Ct> 40 hoặc Ct rỗng và Ct ≤ 35 trong kênh VIC trong lần kiểm tra thứ hai.
c) Âm tính: Ct> 40 hoặc Ct rỗng và Ct ≤ 35 trong kênh VIC.
d) Kiểm tra lại: Ct> 40 hoặc Ct rỗng và Ct> 35 trong kênh VIC.
Người liên hệ: Ld
Tel: +8613480985156
